一 . 实验原理：

1. 酵母染色： 许多酸性染料不易穿过活细胞的质膜进入细胞内，却能渗入死亡的细胞内，亚甲基兰能够进入死亡的酵母细胞，使其着色，从而能够鉴别死活细胞。

2. 口腔上皮染色：碘—碘化钾为碱性染料，能够将细胞染成黄色，细胞中染色最深的是细胞核。

3. 肝细胞染色：瑞氏染料是由碱性染料美蓝和酸性染料伊红组成的染色剂，能使细胞核称呈蓝色，细胞质呈红色。

4. 小麦根尖染色： 醋酸洋红能将染色体染为深色。

二 . 实验目的：

1. 是用高倍镜观察几种细胞，比较几种细胞的异同点。

2. 运用制作临时装片的方法。

三 . 实验材料：

酵母，猪肝，小麦根尖。

四 . 实验用具：

显微镜，载玻片，盖波片，镊子，滴管。

五．试剂配置：

0.2 ％亚甲基蓝染液：称取 0.2g 亚甲基蓝粉末，溶于 100mL 蒸馏水中。

碘—碘化钾溶液的配置：称取 1.7 g 碘化钾固体溶于 250mL 蒸馏水中，充分溶解后加入 0.83g 碘。

瑞氏染色剂：称取瑞氏色素 0.1g 放入研钵中，加入 1mL 甘油，进行研磨，充分研磨后用 60mL 甲醇冲洗研钵，得到的液体储存于棕色瓶中。

醋酸洋红染色液：量取 45mL 醋酸，加入 55mL 水，然后加热至沸腾，加入 1.0g 洋红粉末，边加边搅拌（不要超过 30s ），溶液冷却至室温，过滤储存于棕色瓶中。

六 . 实验方法：

1. 制作临时装片

酵母：用无菌环在酵母斜面培养基上取少量酵母于洁净载玻片上，滴一滴 0.2 ％亚甲基蓝染液，加盖片， 2 分钟后于显微镜下观察细胞。

口腔上皮细胞：滴一滴碘—碘化钾溶液，用无菌牙签在口腔内侧壁上轻轻刮几下，用牙签上附有碎屑的一端，在滴有碘—碘化钾溶液的载玻片上涂抹几下，盖上盖波片，用吸水纸吸干盖波片周围的液体，于显微镜下观察细胞。

肝细胞：剪取新鲜肝脏上的 1 小块，将其新鲜切面在玻片上压印或涂抹成一薄层，滴加瑞氏染色液，轻轻晃动玻片，使与染液混匀。约经 5 分钟左右，直接用蒸馏水冲洗 ( 不可先将染液倾去 ) ，盖上盖波片，于显微镜下观察细胞。

小麦根尖：剪取根尖 2 -3mm ，立即放入盛有盐酸和酒精的混合液（ 1 ： 1 ）的玻璃皿中，在室温下解离 5min ，用镊子取出，放入盛有清水的玻璃皿中 10min ，用镊子取出放在载玻片上，滴一滴醋酸洋红，染色 5min ，盖上盖玻片，用镊子后端轻敲盖玻片，使细胞分散，于显微镜下观察细胞。

2. 显微镜观察

（ 1 ）低倍镜观察（先对光，后调焦）

（ 2 ）移动玻片，将要放大的物像移到视野正中央

（ 3 ）转动转换器，移走低倍物镜，换上高倍物镜

（ 4 ）调节光圈和反光镜，使视野亮度适宜

（ 5 ）转动细准焦螺旋，使物像清晰

七 . 实验结果

　　　

　　口腔上皮细胞 400 × 　　　　　　　　猪肝脏细胞 400 ×

　　　

　　　酵母细胞 400 ×　　　　　　　　　　　　　小麦根尖 400 ×

八．建议课时安排

老师在课前进行实验材料的准备和溶液的配制，需要一个课时进行装片的制作观察，但由于需要做的装片较多，建议教师可挑出一到两种细胞进行临时装片的制作。

九. 注意事项及讨论

1. 调节粗准焦螺旋使镜筒下降时，双眼要注视物镜与玻片之间的距离，到快接近（约 0.5cm ）时或者粗准焦螺旋不能再向下转动为止时停止下降。

2. 使用高倍镜观察时，不能转动粗准焦螺旋。